利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒
本研究在前期构建的兔出血症病毒(Rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.然后用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中也检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变,其半数组织感染量(TCID50)可达104.6/ml.最后大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电镜下可观察到RHD病毒粒子.上述实验结果证明我们利用反向遗传学技术首次获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.
兔出血症病毒 反向遗传学 全长cDNA RK13细胞
刘光清 倪征 云涛 张玉颖 盛祖恬
浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,农业部病毒学与生物技术重点实验室,浙江,杭州,310021
国内会议
中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会
大庆
中文
626-630
2006-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)