甜菜碱优化LD-PCR检测血友病A基因倒位的初步研究
目的:利用新的PCR增强剂甜菜碱优化长距离PCR(LD-PCR)实验条件,提高血友病A(HA)基因倒位检测效果.方法:利用LD-PCR直接检测FⅧ基因22号内含子(IVS22)倒位,在LD-PCR反应体系中加入DMSO、甘油、甜菜碱等PCR增强剂,及不同浓度的甜菜碱进行LD-PCR扩增,比较扩增结果.用LD-PGR直接检测正常人、不同轻重型的HA患者及携带者的FⅧ基因是否存在IVS22倒位.结果:在反应体系中加入甜菜碱可获得比不加增强剂或加入其他增强剂更好的LD-PCR结果;甜菜碱增强LD-PCR的最佳终浓度为0.8～1.8M;应用优化后的LD-PCR检出3名HA患者,2名携带者和1名可疑携带者FⅧ基因有IVS22倒位.结论:一定浓度的甜菜碱可以显著提高LD-PCR扩增的特异性和扩增效率.应用优化后的LD-PCR,可以高效、准确地检测出HA患者的FⅧ基因IVS22倒位,提高HA患者及携带者的基因诊断效率.
甜菜碱 LD-PCR 血友病A 扩增效率 基因诊断
吴斌 杨威
中国医科大学附属第二医院血液内科,沈阳,110004
国内会议
昆明
中文
102-105
2006-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）