会议专题

海藻糖合成酶的改性研究:分子进化与半理性设计

海藻糖合成酶(trehalosesynthase,EC5.4.99.16)是一种于上世纪90年代中期从微生物中发现的新型酶,它能将底物麦芽糖的α,α1,4糖苷键经分子内重排而转变为α,α1,1糖苷键,产物是海藻糖.。本研究利用我们独立分离到的五个海藻糖合成酶基因,进行定向的分子进化筛选。酶的目标性状分别是Kcat 值和耐高温能力的提高。在理性设计方面,由于目前数据库中尚未有任何一个海藻糖合成酶的3D 结构,我们在进行酶的结晶与3D 结构解析的同时,应用生物信息学手段如DiAlign2 中的新算法寻找这五个基因的进化保守区。结果发现了至少有两个区域在不同微生物种属之间是高度保守的。我们对这两个区域(各为约35个氨基酸)进行了饱和突变(saturation mutagenesis)的研究。

海藻糖合成酶 分子进化 半理性设计 生物信息学

黄日波 韦宇拓 王青艳 卢福燊 蒙健宗 朱绮霞 卢运昆 黄鲲

广西科学院,南宁市,530022;广西大学生命科学与技术学院,南宁市,530004 广西大学生命科学与技术学院,南宁市,530004 广西南宁中诺生物工程有限责任公司,南宁市,530004

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2004-11-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)