重组活性羧肽酶B的克隆表达及复性研究
羧肽酶B(carboxypeptidaseB,CPB,EC3.4.17.2)是一种含锌的胰外肽酶,特异的水解肽链C端的碱性氨基酸:精氨酸,赖氨酸或鸟氨酸,CPB含307个氨基酸,分子质量35ku。 本文研究，天然存在的CPB是由前羧肽酶原B(preprocarboxypeptidaseB)产生的,其N-末端包含108个氨基酸(其中13个氨基酸为信号肽序列,95个氨基酸组成活性肽部分)的片段与C端的CPB相连,前羧肽酶原B在转运到内质网的过程中,信号肽被切掉,得到不具酶活性羧肽酶原B(procarboxypeptiedaseB,pCPB)从细胞中分泌出来,然后通过胰蛋白酶将其酶解为具酶活性的CPB和活性肽部分.由于CPB是一种蛋白水解酶,在体内以酶原形式分泌,直接表达CPB可能会对表达系统产生影响,故考虑用酶原的形式表达,表达出的pCPB再进行胰蛋白酶酶切获得具酶活性的CPB。
羧肽酶B 重组活性羧肽酶B 克隆表达 胰蛋白酶酶切
李素霞 张育坚 夏文超 龚毅 袁勤生
华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海200237;中国科学院上海生命科学研究院生物工程中心,上海200233 中国科学院上海生命科学研究院生物工程中心,上海200233 华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海200237
国内会议
昆明
中文
27-31
2004-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）