铁超氧化物歧化酶的纯化与性质研究
目的:从钝顶螺旋藻中分离纯化Fe-SOD,并研究抑制剂(H2O2、NaN3和乙腈)以及变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和DTT)对SOD的影响. 方法:依次用超声波破碎、硫酸铵沉淀、DEAE-FF阴离子交换层析和SephadexG-100分子筛层析从钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)中分离纯化得到超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD,EC1.15.1.1).取适量纯化的纯酶液在不同的变性剂或抑制剂存在条件下,保温一定时间后,测定其酶活,或用活性电泳考察这些变性剂或抑制剂对酶的影响情况. 结果:纯化的SOD达到SDS-PAGE纯,比活达4576U/mg.protein,回收率达到44.7％;H2O2对酶有很强的抑制效果,而NaN3和乙腈几乎不对酶产生抑制;高浓度的尿素和盐酸胍对该酶活力影响明显,1％的SDS就能引起酶变性失活,而1％DTT对酶活性没有影响. 结论:钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶是一种Fe-SOD,它容易受SDS和尿素及盐酸胍影响而变性失活.
钝顶螺旋藻 铁型超氧化物歧化酶 分离纯化 变性剂 抑制剂 酶活性
夏文超 李素霞 袁勤生
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物工程学院,上海,200237
国内会议
昆明
中文
593-599
2004-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）