腈水合酶的分离纯化研究
本文对于腈水合酶分离纯化及其酶学特性的研究,不仅可加深对腈酶反应的认识,丰富酶学理论,而且可拓展腈类化合物生物催化这一领域的范围,深化生物催化理论.在应用上,通过对酶的分离纯化,获得的结晶体的酶制剂有利于酶的构象分析和下游蛋白质组学研究,并应用于工业生产中,具有较大的经济效益. 本研究主要从上海农药所的Nocardiasp.163菌株出发,纯化过程包括超声波破碎、(NH4)2SO4分级沉淀、透析、强碱性阴离子交换层析、SephadexG-100凝胶过滤.分离过程所用的缓冲液为pH7.5的50mMTris/HCL.实验结果表明:经纯化后的腈水合酶比活力高,纯化倍数达到20倍左右.分析结果显示,腈水合酶的最适pH值为7.2-7.5左右,最适反应温度为32℃.腈水合酶在Ph6-8之间较为稳定,过酸或过碱酶活损失比较大.而且腈水合酶的热稳定性比较差,高温条件极易热变性.
腈 腈水合酶 分离纯化 酶学特性 蛋白质组学
廖春燕 郑裕国 沈寅初
浙江工业大学生物工程研究所,浙江,杭州,310032
国内会议
南京
中文
19-23
2004-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）