大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA的克隆与表达
从大熊猫脑垂体中提取总RNA,利用RT-PCR技术,首次扩增出大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA序列(GenBank登录号:AY161285).结果表明,大熊猫PRL cDNA的开放阅读框为687bp,编码含229个氨基酸残基的前体蛋白.将克隆的PRL cDNA片段构建到表达质粒pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21,在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下表达PRL蛋白.SDS-PAGE电泳结果表明,表达的PRL蛋白为不可溶蛋白.蛋白质同源性比较显示,大熊猫与猪、猫的同源性大于95﹪,与人、牛、山羊在70﹪~80﹪之间,与小鼠、大鼠的分别为45.9﹪和52﹪.大熊猫aa<”64>为丝氨酸,是亲水性氨基酸;而猫、牛、山羊(脯氨酸)和人(丙氨酸)aa<”64>是疏水性氨基酸.在二级结构上,aa<”64>在第一α螺旋与第二α螺旋之间,极性的差别可能导致蛋白空间结构的不同.
垂体泌乳素(PRL) cDNA克隆 大熊猫
郑旭 张志和 胡细连 廖鸣娟 张安居 朱睦元
浙江大学生命科学学院遗传学研究所(杭州) 浙江大学生命科学学院遗传学研究所(杭州);成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危动物繁殖与保护遗传重点实验室(成都) 浙江大学生命科学学院遗传学研究所(杭州);杭州师范学院生命科学学院(杭州) 成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危动物繁殖与保护遗传重点实验室(成都)
国内会议
北京
中文
93-99
2004-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）