圆形精子细胞的分离和体外成熟的初步研究
在男性不育症患者中,大约有10％是由无精子症引起的.无精子症分为精子通路梗阻或缺如导致的梗阻性无精子症和精子发生障碍导致的非梗阻性无精子症(nonobstructive azoospermia),而减数分裂阻滞(meiotic arrest)(主要发生在初级精母细胞阶段)又是非梗阻性无精子症不育的主要原因,以往临床对这类患者常常缺乏有效的治疗方法.现代辅助生殖技术的发展恰好为体外培养精细胞治疗无精子症提供了技术条件:1992年卵胞浆内单精子注射术(ICSI)、1995年卵胞质内圆形精子细胞显微注射术(round spermatid injection、ROSI)、1996年胞质内长形精子细胞显微注射术(elongated spermatid injection、ELSI)已获得成功.因此,用无精子症患者未成熟的精子在体外培养到精子细胞成熟阶段或成熟的精子,再通过辅助生殖技术使其获得自己的后代,从而解决了无精子症不育的问题.本文有两个目的:第一,应用非连续性Percoll梯度方法分离未成熟生殖细胞.第二个目的是通过圆形精子细胞与Vero细胞的体外共同培养,使圆形精子细胞发育成为更成熟的形式,这一方法克服圆形精子细胞的成熟障碍并提高了受精率.结果表明:非连续性Percoll梯度方法是较好地分离未成熟生殖细胞的一种方法,在30％-45％的Percoll梯度中有高密度的生殖细胞,只混有少量的白细胞,用这一技术,一方面在一定程度上解决了细胞难鉴别的问题.在4例病人中共获72个圆形精子细胞,其中共同培养44个,有15个成为长形精子细胞(占34％),有24个表现出一定程度的成熟(占54％),培养后的圆形精子细胞取5个进行,其中有3个授精,发生卵裂 但是没有发育成囊胚.表明经过共同培养后圆形精子细胞表现出一定程度的成熟,授精能力也有提高.此方法应用于临床尚需进一步探索.
精子细胞 体外成熟 男性不育症 辅助生殖技术 细胞分离
王植柔 刘锋 丘映 檀大羡
广西医科大学
国内会议
四川绵阳
中文
118-121
2004-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）