人Epsilon干扰素(hIFN-ε)的基因克隆和表达
目的:构建表达hIFN-ε基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白.方法:用TNFα刺激LeLa人宫颈癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcDNA3.1/myc-his(-)A 真核表达载体连接,构建重组体pcDAN3.1/A-hIFN-ε,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性.结果:经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFN-ε,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白.结论:本研究成功地克隆出hIFN-ε基因编码序列并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-ε蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因重组药物研制奠定了基础.
人干扰素 基因克隆 真核表达载体 抗病毒活性
马丽丽 盛伟华 谢宇锋 缪竞诚 王金志 庄文卓 李丽娥 杨吉成
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室
国内会议
长沙
中文
41-46
2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）