人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达
目的:构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白.方法:用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcDNA3.1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建生组体pcDNA3.1A-hIFN-λ3,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性.结果:经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFNλ-3,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白.结论:本研究成功地克隆出hIFN-λ3基因编码序列并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因治疗奠定了基础.
基因克隆 真核表达 抗病毒活性 干扰素 基因治疗
马丽丽 王建红 盛伟华 谢宇锋 杨吉成
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室
国内会议
长沙
中文
35-41
2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）