烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆、原核表达及抗血清的制备
根据已报道烟草蚀纹病毒(TEV)外壳蛋白基因序列,合成两个寡聚核苷酸引物,采用RT-PCR的方法获得烟草蚀纹病毒山东(TEV-SD)分离物的外壳蛋白(CP)基因的cDNA,然后以获得的cDNA为模板进行PCR扩增.将所得的PCR产物通过T4 DNA连接酶连接到原核表达载体PET-22b(+)中,并转化大肠杆菌BL21.序列分析表明:TEV-SD的CP基因全长789bp,编码263个氨基酸;与GenBank中,已报道的TEV分离物的核苷酸序列有极高的同源性,达94.1﹪~98.6﹪.37℃培养条件下,经IPTG(终浓度1mmol/L)诱导,SDS-PAGE电泳显示,表达的融合蛋白分子质量约为33kDa.用表达的特异性蛋白制备抗原,免疫家兔制备出病毒特异抗血清;抗血清的效价为1/2048,且具有良好的特异性.
烟草蚀纹病毒 外壳蛋白基因 原核表达 抗血清
朱常香 王玉军 郭兴启 程云吉 温孚江
山东农业大学生命科学学院(山东泰安) 山东农业大学植物保护学院(山东泰安) 山东烟草临沂有限公司(山东临沂)
国内会议
武汉
中文
573-580
2004-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）