高致病力禽流感毒株NP基因的克隆及其在E.coli中的表达
以禽流感分离株A/chicken/Hubei/326/2002病毒RNA为模板,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增了NP基因的cDNA,全长1580bp,将此扩增产物克隆进pMD18-T载体,进行了重组质粒的酶切鉴定.氨基酸序列分析表明,与GenBank中收录的AIV其它病毒株NP全基因的同源性在92﹪以上.进一步克隆NP基因主要抗原表位区(1000bp),构建原核表达质粒pET-NP”,经IPTG诱导,在E.coli BL21(DE3)中获得表达,SDS-PAGE显示,表达的蛋白分子量为34kD,并形成包涵体.Western印迹分析表明,表达蛋白能与AIV标准阳性血清发生特异性反应,证明NP基因获得了表达,表达蛋白具有生物学活性.
禽流感(AIV) NP基因 克隆 表达 逆转录聚合酶链反应 血清学
王贵华 金梅林 赵思婷 张瑞华 陈焕春
华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室(武汉)
国内会议
贵阳
中文
352-356
2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）