犬新孢子虫(Neospora caninum)NcSRS2基因的克隆与融合蛋白的表达
本研究用新孢子虫Nc-1株接种小鼠,分离脑组织,从脑组织中提取虫体的RNA,对己知的新孢子虫NcSRS2基因序列进行部分取舍,用RT-PCR方法扩增并克隆出截短的NcSRS2基因,插入到pGEX-6p-1质粒的多克隆位点,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,于氨苄阳性LB培养平板上筛选阳性克隆,酶切及PCR鉴定;经IPTG诱导在E.coli中表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析并纯化表达产物.结果表明,NcSRS2基因体外扩增产物与预期值相符,约1041bp;所构建pGEX-6p-NcSRS2重组质粒阳性克隆经双酶切与PCR鉴定,与预期结果一致;SDS-PAGE和免疫印迹显示,表达融合蛋白产物约为62.6kD,表达效率为32.3﹪;并对表达的融合蛋白进行纯化.
犬新孢子虫 NcSRS2基因 基因克隆 融合蛋白
余劲术 刘群
中国农业大学动物医学院(北京)
国内会议
中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第5次代表大会暨第8次学术研讨会
桂林
中文
51-55
2004-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）