猪圆环病毒2型感染后PBMCs中IL-2 mRNA的动态变化
通过RT-PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMCs)中扩增和克隆了猪细胞因子IL-2 338bp的部分序列,并得到pGEMT-IL2质粒;在pGEMT-IL2基础上利用反向PCR技术构建了缺失92bp的pGEMT-dIL2 cDNA竞争质粒.对pGEMT-dIL2质粒进行10<”-7>倍稀释后同2×10<”5>~2<”10>×10<”5>倍系列的pGEMT-IL2质粒采用同一对引物进行竞争PCR,将产物在2﹪琼脂糖凝胶上电泳后,采用Kodak KDS1D3.0软件进行分析后,以338bp片段同246bp片段的分子个数比的对数值作纵坐标,以不同稀释倍数pGEMT-IL2质粒的分子个数的对数值为横坐标建立了直线回归方程,其相关系数为0.95.采用该直线回归方程对人工感染猪圆环病毒2型(PCV2)SPF猪后3、7、10、14、21、28、35和42天PBMCs中IL-2 cDNA变化的分析结果表明,感染后21天IL-2 cDNA上升,至28天出现峰值,至35天基本回复到初始水平,而后进一步攀升至42天,且攻毒组同对照组在感染后14和21天IL-2 cDNA水平经t试验分析结果表明差异极显著(P<0.01).
猪圆环病毒2型 IL-2质粒 定量竞争PCR 动态变化 外周血单核淋巴细胞
司兴奎 何芳 周双海 郑洁 郭鑫 陈艳红 杨汉春
中国农业大学动物医学院(北京)
国内会议
中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
北京
中文
866-870
2004-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)