胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3′-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备

摘要：

本研究参照胸膜肺炎放线杆菌血清1型apxⅣA基因序列合成两条特异性引物,从本实验室分离鉴定的菌株中扩增到apxⅣA3,大小2993bp,克隆到pMD-18T中构建克隆载体pTapxⅣA3,鉴定后,将apxⅣA3插入原核表达载体pET-28b,构成原核表达载体pETapxⅣA3.将pETapxⅣA3转化BL21(DE3),IPTG诱导,apxⅣA3成功获得表达,即ApxIVAC,表达的特异性带115KD.Dot blotting证实ApxIVAC具有免疫学活性.ApxIVAC主要以包涵体形式存在,将包涵体变性、复性后,免疫Balb/c鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0融合,经筛选、克隆后获得5株稳定分泌抗ApxIVC单克隆抗体的杂交瘤细胞,为研究ApxIV的作用机制提供了特异性的试剂.

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌 毒素Ⅳ 单克隆抗体 原核表达 猪传染性胸膜肺炎 基因克隆

作者: 黄红亮 陈焕春 陈美玲 贝为成 严琳

作者单位: 华中农业大学动物医学院动物病毒室(湖北武汉)

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 745-747

在线出版日期: 2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）