禽流感病毒核蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要：

以1株H<,5>N<,1>亚型禽流感病毒RNA为模板扩增NP全基因cDNA,并在大肠杆菌中进行表达.方法:提取禽流感病毒RNA,以RT-PCR法扩增编码NP基因cDNA并测序,将其克隆到pET-28a原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达,用SDS-PAGE和Western blotting检测表达产物.所克隆的核苷酸片段包含了核蛋白基因完整阅读框架,编码498个氨基酸,构建的重组表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达出分子量约为55000的重组蛋白,该重组蛋白具有良好的免疫原性.成功克隆和体外原核表达了禽流感病毒核蛋白基因,该研究成果禽流感新型免疫学诊断试剂的研制奠定了基础.

关键词： NP基因 序列分析 原核表达 禽流感病毒 核蛋白 基因克隆

作者: 王振国 金宁一 马鸣潇 郑敏 张洪勇

作者单位: 解放军军事医学科学院军事兽医研究所(长春)

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 929-932

在线出版日期: 2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）