玻璃化冷冻牛卵母细胞支持体细胞克隆胚的体内外发育研究

摘要：

本研究目的是研究牛卵母细胞经玻璃化冷冻后的体内外发育能力及对克隆胚发育的支持.采用EDFS30、EDFS40、EDFSF30和EDFSF40玻璃化冷冻液,对牛体外成熟培养16h的卵母细胞实施OPS法冷冻保存,冷冻解冻后卵母细胞的存活率分别为77.0﹪和79.1﹪及97.2﹪和97.5﹪.利用A23187和6-DMAP联合化学激活后其囊胚发育率达10.3~23﹪,与对照组(33.2﹪)差异不显著(P>0.05).并用722枚卵母细胞进行体细胞克隆牛的制备,融合343枚(47.6﹪),经过7天培养后有56枚(16.3﹪)重构胚发育至囊胚,其中24枚胚胎移植给6头同期处理的受体母牛,其中2头受体妊娠(33.3﹪),流产1头.另一头于妊娠263天分娩.结果表明用玻璃化冷冻解冻的牛卵母细胞可以支持体细胞克隆胚胎的体内外全程发育.

关键词： OPS法 玻璃化冷冻 卵母细胞 核移植 卵子激活 胎儿成纤维细胞 体细胞克隆牛 胚胎移植

作者: 侯云鹏 戴蕴平 朱士恩 朱化彬 吴通义 龚国春 王海平 王莉莉 刘颖 李荣 万荣 李宁

作者单位: 中国农业大学动物科技学院(北京) 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室 中国农业大学动物科技学院(北京);中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室 中国农业科学院畜牧所

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 540-544

在线出版日期: 2004-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）