腺嘌呤脱氨酶在大肠杆菌中的MBP融合表达及活性测定

摘要：

我们扩增了枯草芽孢杆菌的ade基因,重组入克隆载体pMal-c2x中,转化入大肠杆菌TB1,构建过量表达MBP(麦芽糖结合蛋白)融合蛋白的表达体系.通过IPTG诱导表达,并用MBP亲和层析法,纯化该融合蛋白,通过SDS-PAGE对表达及纯化结果进行检验.我们利用光吸收法测定该酶的活性,结果表明该酶需要Mn<”2+>作为辅助因子,其最适PH值为7.0~7.3,最适温度为67℃,表观米氏常数为0.08mM.枯草芽孢杆菌腺嘌呤脱氨酶的鉴定及其活性测定对于明确枯草芽孢杆菌中腺嘌呤代谢具有重要意义.

关键词： 腺嘌呤脱氨酶 融合表达 活性测定 大肠杆菌 麦芽糖结合蛋白 融合蛋白

作者: 岳晓婧 谢承志 崔银秋 Sunny Zhou 周慧

作者单位: 吉林大学生命科学学院大分子实验室(长春) Department of Chemistry,Washington State University

会议类型: 国内会议

会议名称: 吉林省第三届科学技术学术年会

会议地点: 长春

会议语种:中文

页码: 923-926

在线出版日期: 2004-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）