自微乳化给药系统对细胞紧密连接蛋白及P-gp的影响
目的:从分子细胞水平考察正、负电荷自微乳化给药系统对细胞紧密连接蛋白复合体和P-糖蛋白的影响.方法:建立了模拟小肠上皮细胞结构的Caco-2细胞模型;测定对跨膜电阻和细胞间转运物质甘露醇转运评价制剂对细胞完整性的影响.应用荧光显微镜和荧光分光光度法测定制剂对P-糖蛋白底物罗丹明-123 Caco-2细胞蓄积的影响.采用免疫荧光法评价两种自微乳化给药系统不同稀释倍数对细胞紧密连接蛋白Zo-1和细胞骨架肌动蛋白(actin)的影响.结果:负电荷自微乳化制剂在不同稀释倍数对跨膜电阻都无显著性影响.正电荷处方在考察的三种稀释倍数显著性降低了跨膜电阻(p<0.05).细胞单分子层经正电荷自微乳制剂处理2h后,再经过48h的培养,较高稀释倍数跨膜电阻能够完全恢复;50倍稀释的处方不能完全恢复(66.3﹪).两种制剂在不同稀释倍数都能够显著提高甘露醇的渗透系数(2.9-64.6倍)(p<0.05),作用与自微乳稀释倍数具有相关性.正负电荷的自微乳化制剂在不同稀释倍数都能够显著提高P-糖蛋白作用底物罗丹明123的细胞蓄积(1.6-6.4倍).在相同的稀释倍数,负电荷的处方增加作用高于正电荷处方.免疫荧光结构表明,经制剂处理后,影响了actin和Zo-1细胞分布,呈现不连续性.正电荷处方由于静电吸引,可能对细胞膜产生压力,比负电荷处方更能影响actin的分布.对细胞紧密连接影响具有制剂稀释倍数的依赖性.结论:自微乳化给药系统能够提高甘露醇的细胞间转运.抑制P-糖蛋白的外排作用,增加作用底物的细胞蓄积.通过影响actin和Zo-1的细胞膜分布的作用机理打开细胞紧密连接.实验结果表明微乳给药系统不仅能够作为难溶性药物的给药载体,而且很有希望成为亲水性、大分子多肽良好的药物载体.
自微乳化给药系统 Caco-2细胞 P-糖蛋白 细胞紧密连接 口服吸收 药物载体
沙先谊 方晓玲
复旦大学药学院(上海)
国内会议
杭州
中文
169-169
2004-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）