基于极化荧光方法的LOX-1配体高通量筛选
目的:建立以极化荧光为检测方法的高通量筛选技术,通过大规模筛选发现氧化型低密度脂蛋白-1受体(LOX-1)的天然配体.方法:密度梯度超速离心获得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),然后用CuSO<,4>(5μmol·L)修饰为氧化型低密度脂蛋白(oxLDL).FITC标记人LOX-1,以受体(LOX-1)和配体(oxLDL)的相互作用为基础建立筛选模型,用极化荧光检测方法,在激发光485nM、发射光525nM,对3200个样品进行高通量筛选,并用Z”因子值评价实验.结果Z”因子值为0.75,根据建立的基于极化荧光的高通量筛选实验方法,发现3个化合物与LOX-1有较高的结合活性,IC<,50>值小于40μmol·L.结论:本研究建立的以极化荧光为检测方法适合于高通量筛选技术,具有较高的稳定性、灵敏性和可重复性.
极化荧光 高通量筛选 氧化型低密度脂蛋白受体 动脉粥样硬化 天然配体
张天泰 杜冠华
中国医学科学院;中国协和医科大学药物研究所
国内会议
杭州
中文
354-356
2004-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）