人外周血NKT细胞体外扩增及细胞内细胞因子表达的研究
目的:建立人外周血自然杀伤T细胞(NKT)体外扩增的方法及检测NKT细胞内细胞因子表达.方法:采用不同的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24<”+>/TCRVβ11<”+>NKT细胞并采用细胞内细胞因子流式细胞术检测手段测定NKT细胞中IL-4,IFN-γ、TNF-α分泌水平.结果:体外扩增效果较好的是在PBMC中的α-半乳糖神经酰胺(α-Galcer)组和DC、α-Galcer组,以及在纯化T淋巴细胞中的DC、α-Galcer组.这3组NKT细胞扩增19天后分别占淋巴细胞的(25.5±7.2)﹪,(18.2±8.2)﹪和(24.8±5.5)﹪,NKT细胞分别扩增了(15.1±9.1)×10<”3>倍,(21.8±17.3)×10<”3>倍和(23.0±16.7)×10<”3>倍,与其它各组有显著性差异(P<0.01).扩增过程TCRVβ11<”+>NKT细胞中分泌IL-4,IFN-γ和TNF-α的细胞比例均高于TCRVβ11<”->T淋巴细胞(P<0.05).结论:本研究结果表明α-Galcer具有体外大量扩增NKT细胞的能力,同时α-Galcer的激活能力受CD1d分子的限制.由于PBMC中的单核系细胞也表达CD1d分子,因此直接从PBMC扩增NKT也能获得良好的效果.
半乳糖神经酰胺 细胞因子 淋巴细胞 体外扩增 医学免疫学
范华骅 郑滨 刘嬿 高跞 高峰 陆华中
上海市血液中心,血液工程研究室
国内会议
上海
中文
53-57
2003-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）