水牛唾液蛋白胃蛋白酶解产物中总阿片样生物活性的测定
本试验旨在控讨唾液蛋白经胃蛋白酶水解是否有阿片样活性物质产生.自5头体重(450±50kg)公水牛口腔采集混合唾液,测定蛋白含量.加入胃蛋白酶,在pH1.4,39℃孵育2小时后,将酶灭活.以孵育前将酶灭活作对照.调pH7.2,8500×g离心30分钟.取上清液和1640培养液各5ml与生长旺盛的NG108-15细胞一起在37℃孵育15分钟.心集细胞,提取细胞内cAMP,放免测定cAMP的含量.发现NG108-15细胞膜上有丰富的阿片受体.受体激活后可引起细胞内cAMP减少,这种作用可被特异性的阿片受体阻断剂纳洛酮(Nal)反转.因此,本试验对照组与试验组分别作加Nal和不加Nal2种处理,以细胞cAMP与胞浆蛋白比值变化判定酶解液是否具有阿片样生物活性.试验结果表明,试验组细胞cAMP含量:不加Nal显著低于加Nal(20.103±2.473)ng/mg蛋白质vs(25.850±2.461)ng/mg蛋白质(P>0.01);以地照组不加Nal差异不显著(27.177±3.738)ng/mg蛋白质vs(27.337±3.461)ng/mg蛋白质(P>0.05).结果表明,唾液蛋白经胃蛋白酶水解抑制NG108-15细胞cAMP产生,这种作用可被Nal反转.提示唾液在消化道中经胃蛋白酶水解产生阿片样生物活性物质;阿片样生物活性物质的在消化道释放可能是内信息向消化道传递的一种途径,其机理有待进一步的研究.
水牛 胃蛋白酶水解产物 阿片样生物活性物质 唾液蛋白
胥清富 田和山 陈伟华 陆天水 陈杰
南京农业大学动物生理化实验室(江苏南京)
国内会议
呼和浩特
中文
261-261
1999-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）