虎流感病毒的分离、鉴定和基因检测
应用F81猫肾传代细胞,从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病科中分离获得者株病毒,经形态学、理化学、生物学和血清学系统鉴定,证明为1株流感病毒.采用流感病毒核蛋白基因引物,对分离病毒及该虎病料进行RT-PCR扩增和序列分析,结果从分离病毒和虎病料理中均扩增出与理论值大小相符的464bp基因片段,其序列与A、B、C三型流感病毒相比较,同源性分别为:A型84.9％以上,B型35.0％左右,C型24.8％左右.该结果说明所分离病毒为A型流感病毒.命名为A/虎/哈尔滨(中国)/01/2002.用HA裂解位点区基因引物从分离病毒中扩增出582bP的片段,氨基酸序列推导结果表明该病毒HA裂解位点区由6个碱性氨基酸组成,符合高致病力流感病毒的特征.用此分离病毒静脉接种3月龄家猫3只,出现与病虎相似的临床症状,1只耐过,2只死亡,剖检变化与死虎相似,主要呈现肺炎病变,并可从病料中回收到所接种病毒.另以此分离病毒为HA抗原,进行虎与猫血清的HI抗体检测,结果康复虎血清比其病初血清、康复猫血清比其接种前血清HI抗体均有4倍以上增高,表明该病毒具有致病性,是引起该虎与实验猫发病甚至死亡的病原.从大型猫科动物虎中发现流感并从中分离获得A型流感病毒,在国内外均属首次.
流感病毒 基因 分离 鉴定 虎 基因检测 血清学
夏咸柱 高玉伟 扈荣良 王立刚 刘丹 邹啸环 黄耕 贺文琦
军需大学军事兽医研究所(长春) 黑龙江省东北虎林园(哈尔滨) 军需大学中心实验室(长春)
国内会议
中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
青岛
中文
337-344
2003-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）