禽流感病毒核蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究

摘要：

本研究根据禽流感病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,采用RT-PCR法成功地克隆了AIV NP基因.经测序证实NP全序列长1542bp,编码499个氨酸,与其它已发表的同亚型AIV的NP基因比较,同源性达97％以上;与不同亚型比较,同源性达92％左右,说明该基因具有高度保守性.将获得的NP基因定向克隆到GST融合原核表达载体pGEX-KG中,并转化入BL21codon plus受体菌中,在IPGT的诱导下获得高效表达.经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定分析,融合表达蛋白GST-NP大小约为84KDa,约占菌体总蛋白的18％,能与鸡抗AIV抗体发生明显的抗原抗体反应.AIV-NP基因的克隆和表达,为开发新型广谱基因工程疫苗和临床快速诊断试剂的研制奠定了基础.

关键词： 禽流感病毒 核蛋白 GST 原核表达 病毒性传染病

作者: 胡思顺 李自力 肖运才 石德时 许青荣 程峰 毕丁仁

作者单位: 华中农业大学畜牧兽医学院(湖北武汉)

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

会议地点: 青岛

会议语种:中文

页码: 159-165

在线出版日期: 2003-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）