会议专题

马立克氏病病毒pp38基因上游的一个双向启动子

马立克氏病病毒(MDV)基因组DNA复制原点区的上游和下游均含有启动子TATA-box、CAAT-box等特征性的保守基元,推测是一个天然的双向启动子.为了在体外验证其双向启动活性,试验以MDVpp38为报告基因插入到pUC18中,构建了pUC-pp38质粒,并将包含该启动子完整区域的789bp序列分别以正反两个方向克隆进pUC-pp38质粒中pp38报告基因的上游,获得的重组质粒pProfpp38和pProrpp38.将所获得的重组质粒分别转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验检测pp38基因的表达以验证该启动子的双向启动活性.实验结果表明:马立克氏病病毒复制原点区的启动子无论以何种方向插入pUC-pp38质粒中,在转染转染细胞24小时内能检测到pp38基因的表达,48小时后能获得高效和持续的表达.同时,我们通过通过PCR技术,逐渐缩小该启动子的范围,最终在320bp时,仍能检测到两个方向的启动活性.

马立克氏病病毒 pp38基因 双向启动子 报告基因 分子生物学

丁家波 崔治中 孙淑红 姜世金

山东农业大学动物科技学院(泰安)

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2003-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)