HIV-1Gag蛋白在大肠杆菌和重组杆状病毒系统中的高效表达及通用型温控原核表达栽体的构建
将中国株ＨＩＶ－１Ｂ亚型的ｇａｇ全基因序列，克隆到杆状病毒表达栽体ｐｆａｓｔｂａｃｌ中，构建了重组质粒ｐｆａｓｔＧａｇ，利用细菌／杆状病毒表达系统筛选重组杆状病毒，在昆虫细胞中高效表达了ＨＩＶ－１Ｇａｇ蛋白。通过改造原核表达载体ｐＢＶ２２０和ｐＥＴ２８，构建了一种新的通用型温控原核表达载体质粒ｐＶＶ５，该载体携带ＰｒＰｌ串联温控启动子及Ｈｉｓ－Ｔａｇ纯化标签，利于目的蛋白表达与纯化。将ＨＩＶ－１ｇａｇ基因的１１４８－１８５７编码序列，分别插入到ｐＶＶ５ｂ、ｐＥＴ２８ｂ的相应点，构建了重组表达质粒ｐＥＧ１ｂ、ｐＥＧ７ｂ，二者在不同受体菌中，表达重组蛋白的量分别占全菌体蛋白总量的４２℅和２８℅。利用ＩＭＡＣ金属螯合层析柱，对包涵体中的重组ｐ２４蛋白进行纯化，纯度超过８０℅；纯化后的重组蛋白可与
HIV-1Gag蛋白 表达 纯化
金宁一 王宏伟 张应玖 张东威 邹啸环
农牧大学基因工程实验室
国内会议
长春
中文
1～2
1999-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）