苜蓿根瘤菌乙酰乙酰-CoA合成酶的过量表达、纯化及其特性
PCR扩增了苜蓿根瘤菌乙酰乙酰辅酶A合成酶编码基因(acsA2),克隆到连接-非依赖型载体pET30LIC;在E.coliBL21(DE3)pLysS中得到了有效表达,表达需IPTG的诱导,诱导3h达到酶活高峰.采用His·Bind柱层析对AACS进行了纯化,纯化的酶蛋白经SDS-PAGE呈单一浓带,分子量约72 000 Da.纯化的AACS除可活化乙酰乙酸外,还有活化L-HB的活性;酶动力学分析显示,该酶对乙酰乙酸的亲和性明显高于对L-HB的亲和性.
苜蓿根瘤菌 乙酰乙酰辅酶A 合成酶 基因表达 纯化酶蛋白
戴美学
山东师范大学生命科学学院(济南)
国内会议
长沙
中文
118-120
2003-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）