一个高抗草苷膦新基因的克隆
从被草苷膦极度污染的土壤中分离到一株极端抗草苷膦菌HTG7,经16s rDNA鉴定其为可变盐单胞菌(Halomonas varabilis).它能在强碱、高盐的环境下或草苷膦浓度为200mmol/L至450mmol/L的MOPs液体培养基中都能正常生长.从该菌的Super Cos1 Cosmid粘粒基因组文库中克隆到一个草苷膦抗性的DNA片段,该片段转化草苷膦敏感菌株JM109后,使受体菌获得高抗草苷膦特性,能在草苷膦浓度为80mmol/L的MOPs液体培养基中良好生长.功能互补试验表明,该基因能恢复EPSP合成酶缺陷型菌株E.coli ER2799在限制性培养基中的生长能力,证明该基因具有编码完整的EPSP合成酶的功能.序列分析结果表明,基因全长1350个碱基对,包含一个完整的阅读框架,核苷酸序列与目前已报导的编码EPSP合成酶的aro A基因几乎没有任何同源性.由450个氨基酸组成的氨基酸序列与草苷膦抗性相关的美国专利所涉及的11种微生物EPSP合成酶的同源性在45﹪以下.表明我们所克隆的是一个结构新颖、功能明确并高抗草苷膦的新基因.
草苷膦抗性 可变盐单胞菌 EPSP合成酶 aro A基因 编码基因
刘柱 徐玉泉 张维 刘光全 平淑珍 陈明 陆伟 杨志荣 林敏
中国农业科学院生物技术研究所(北京);四川大学生命科学学院(成都) 中国农业科学院生物技术研究所(北京)
国内会议
长沙
中文
78-81
2003-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）