钆对小鼠腹腔巨噬细胞作用的研究
本文以小鼠腹腔巨噬细胞为对象,研究了稀土元素—钆对其功能的影响,并初步探讨了钆的作用形式以及相关的作用机制.实验结果发出不同浓度的钆(2×10<”-3>mol/L~2×10<”-6>mol/L,RPM1640培养基终浓度)均可在较短时间内(小于4小时)引起细细胞膜对台盼兰通透性显著上升,该效应具有明显的浓度及时间依赖性.采用激光共聚焦显微镜技术,以DCFH为荧光探针检测了不同浓度钆作用细胞一小时后胞内的活性氧水平.结果表明,高浓度钆(2×10<”-3>mol/L、2×10<”-4>mol/L)可引起胞内活性氧水平显著上升,较低浓度的钆(2×10<”-5>mol/L、2×10<”-6>mol/L)作用不显明,该趋势与台盼兰染色结果一致.综合以上两点,提示钆可以在较短时间内造成细胞损伤.中性红摄取实验结果表明,对于台盼兰实验阴性组(即膜通透性未改变组),钆的存在不影响巨噬细胞对中性红的胞饮.同时,运用激光共聚焦显微技术,考察了钆作用一小时后巨噬细胞吞经调理的荧光标记酵母多糖(FITC-labeled Zymosan A)的能力.结果表明,较高浓度钆(2×10<”-3>mol/L、2×10<”-4>mol/L)明显抑制巨噬细胞对酵母多糖的吞噬,吞噬指数以及平均吞噬数均显著下降,较低浓度的钆(2×10<”-5>mol/L)与对照组无明显差异,这种量效关系与钆引起的细胞损伤的量效关系一致.以上结果说明,稀土钆引起的巨噬细胞功能改变与钇引起的细胞损伤密切相关,吞噬能力的下降是细胞损伤的结果.为说明钆的作用形式,采用0.45um滤膜过滤的方法,分离了沉淀形式的钆和可溶性钆.实验结果表明,来自于各种初浓度的滤液在4小时内均不引起细胞损伤,也不影响细胞对酵母多糖的吞噬,各浓度间没有明显差异.ICP-MS的测定结果表明,滤液中总稀土浓度为5×10<”-8>mol/L.因此,引起巨噬细胞损伤的主要是钆沉淀.进一步的对比实验表明,钆沉淀与磷酸钙沉淀均可引起细胞膜通透性增加,但钆沉淀作用更强.综上,钆可以抑制巨噬细胞的吞噬功能,基原因在于钆引起的巨噬细胞损伤,尤其是膜损伤,这种作用在短时间内即可的生,其原因在于钆引起的巨噬细胞损伤,尤其是膜损伤,这种作用在短时间内即可产生,其中沉淀形式的钆起主要作用,其详细的作用过程有待于进一步研究.
钆 巨噬细胞 吞噬 细胞损伤 生物效应
胡健 姜军 刘湘陶 李荣昌 王夔
北京大学药学院化学生物学系(北京)
国内会议
北京
中文
109-109
2002-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）