HSV-tk基因联合GCV对人胆管癌细胞的杀伤作用
目的:观察单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)基因治疗系统在体内外对人胆管癌细胞的杀伤效应.方法:将HSV-tk基因定向克隆入逆转录病毒载体pDOR-neo的SV40下游.重组逆转录病毒载体pDOR-tk-neo转染至病毒包装细胞PA317,产生的重组病毒将HSV-tk转入人胆管癌细胞系QBC939细胞内,筛选出稳定表达tk的细胞克隆QBC939/tk.测定QBC939/tk细胞在体外对GCV的敏感性及其旁杀伤效应;QBC939/tk细胞在裸鼠臀部皮下成瘤,观察GCV的治疗作用.结果:斑点杂交实验及药敏实验均证实HSV-tk基因已整合至宿主细胞DNA中并稳定表达.体外实验表明GCV对QBC939/tk细胞有明显的杀伤作用,且其作用呈现剂量和时间依赖性特点以及旁杀效应,GCV对母本细胞则无明显毒性.裸鼠体内实验得到相似结果.腹腔注射GCV后对移植瘤有明显治疗作用.结论:研究结果表明:表达HSV-tk的人胆管癌细胞在体内外均可被GCV有效杀伤,逆转录病毒载体介导的HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统可作为胆管癌基因治疗的潜在途径之一.
胆道肿瘤治疗 基因治疗 逆转录病毒科 胸苷激酶
赵亚刚 张宏斌 张学庸 周兰 周梅花 惠宏襄
广州军区广州总医院消化内科
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372-379
2002-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）