重组胸腺素α<,1>的纯化及活性
将胸腺素α<,1>基因4串体克隆于pTHioHisA融合表达载体(pTHioHisA-T(α<,1>④)，转化大肠杆菌TOP10。在IPTG诱导下，融合蛋白得到了高效表达。SDS-PAGE分析确定诱导表达 的融合蛋白占菌体总蛋白的40℅，一表达的融合蛋白主要以可溶形式存在。反用离子交换层析可纯化出目的蛋白进行CNBr化学裂解，经简单的离子交层析可纯化出胸腺素α<,1>单体，HPLC鉴定胸膛素α<,1>的纯度达98℅。利用<,3>H-TdR进行生物活性测定，证实融合蛋白和胸腺素α<,1>单体均具有在致有丝分裂原ConA存在的条件下，刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力，具有和化学合成的胸腺素α<,1>相似的生物活性。此研究为胸腺素α<,1>的大规模开发生产奠定了基础。
胸腺素 融合表达 蛋白质纯化 生物活性 融合蛋白
石继红 张英起 赵宁 赵永同 颜真
第四军医大学生物技术中心
国内会议
石家庄
中文
117～121
2000-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）