脐血造血于细胞分离和冻存方法初探
用人类脐血干／祖细胞代替骨髓移植，治疗辐射损伤性疾病，并为辐射损伤病人和核事故受害者的治疗建立脐血干细胞库是一重要课题。而脐血造血干细胞的分离与冻存是建立脐血千细胞库、进行干细胞移植的关键。该文研究了脐血造血干细胞的分离和冻存方法。首先用密度梯度离心法以不同比重的淋巴细胞分离液（Ficoll液）分离脐血单个核细胞（MNC），计数并用单抗经流式细胞仪进行表型分析；然后加冻存保护剂程控降温冻存于液氮中，再间隔同一时间常规复苏MNC，采用“三种梯度降温法”、”五种不同细胞浓度”和“两种细胞冻存保护剂”比较了不同条件下脐血MNC的分离和冻存效果。结果显示，使用比重为1．064的Ficoll液较常规1．077所分离的MNC量为少，但前者CD<”+><,34>细胞较多，约为后者的3倍；梯度降温以直接放人液氮口（-96℃）过夜，再置入液氮内（-196℃）低温保存最佳，细胞浓度以2×10<”7>为宜；冻存保护剂以含10℅DMSO、90℅胎牛血清最好。
脐带血 造血干细胞 分离 冻存
张占英 张澜生
医学院
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1～5
1998-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）