基因Ⅶ型新城疫病毒调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及诱导脾脏免疫病理的机制研究
细胞外基质(ECM)重构对基因Ⅶ 型新城疫病毒(NDV)诱导鸡脾脏的免疫病理损伤具有重要影响.本研究旨在探讨基因Ⅶ 型NDV调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及对ECM重塑的影响,进一步解析基因Ⅶ 型NDV的致病机理.首先,用荧光定量PCR与Western blot方法 对基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染脾脏中MMP-1、MMP-13与MMP-14的表达水平进行测定.其次,选用鸡外周血单个核细胞(PBMC)为细胞模型,测定不同MMP的表达水平及MMP-14的细胞定位与膜表达水平.最后,建立了评价PBMC侵袭力的Transwell模型与测定细胞降解胶原蛋白能力的模型,并测定了基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染对PBMC侵袭力与胶原降解能力的影响.结果 表明,与基因Ⅳ型NDV Herts/33相比,基因Ⅶ 型NDV JS5/05株可显著上调鸡脾脏与PBMC中MMP-13与MMP-14的表达水平,尤其是MMP-14.MMP-14在JS5/05感染的PBMC中在细胞质、细胞核与细胞膜上均有定位,但是在细胞膜上的表达水平显著高于Herts/33感染的细胞.细胞侵袭实验表明,JS5/05感染的PBMC在趋化因子的诱导作用下,其侵袭力显著强于Herts/33感染细胞.此外,JS5/05感染的PBMC对Ⅰ型胶原蛋白的降解能力也显著高于Herts/33感染细胞.基因Ⅶ型NDV可显著上调PBMC中MMP-14的表达水平,激活其降解胶原蛋白的活性,使炎性细胞突破ECM屏障的侵袭力显著增强.因此,基因Ⅶ 型NDV调控MMP-14的活性可能对其诱导的脾脏免疫病理损伤有重要的影响.
基因Ⅶ型 新城疫病毒 基质蛋白酶14 细胞外基质 脾脏 免疫病理 致病机制
胡增垒 顾晗 胡顺林 焦新安 刘秀梵
扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州 225009 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州 225009;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009;江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州 225009;农业部农产
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2019-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）