鸭TNNI1基因启动子克隆及其活性分析
(目的)旨在通过克隆鸭慢速骨骼肌型肌钙蛋白I 1(Slow skeletal muscle troponin I 1,TNNI1)基因5'侧翼区序列,进行活性区域分析,初步探索TNNI1 基因转录调控机制.(方法)采用染色体步移方法克隆测序获得鸭TNNI1 基因5'侧翼区序列,采用在线生物信息软件进行转录因子结合位点分析,构建全长及系列缺失报告基因表达载体,转染293T 细胞,采用双荧光素酶系统检测不同缺失片段的启动子活性.(结果)结果,克隆获得鸭TNNI1 基因5'侧翼区序列2078bp,预测存在TBP、C/EBP、SP1、MyoD,MRF4、YY1 等多个转录因子的结合位点和2 个CpG 岛.双荧光素酶活性分析发现,随着启动子5'侧翼区序列的截短,荧光素酶活性逐渐下降,但均极显著高于pGL3-Basic 空载体(P < 0.01),其中-2 078/-1 bp片段启动子活性最强.-2 078/-1 695 bp 区域为核心启动子区域,-469/-1 bp 区域具备基本的启动子活性,-1 695/-885 bp 区域可能存在正调控元件,-885/-469 bp 区域可能存在负调控元件.(结论)结果表明,克隆获得的鸭TNNI1 基因5'侧翼区序列具有启动子活性,确定了核心启动子区和主要调控区域,为进一步研究鸭肌肉组织中TNNI1 基因的表达调控奠定了基础.
鸭 TNNI1基因 启动子 活性分析
姬改革 刘一帆 单艳菊 章明 屠云洁 巨晓军 束婧婷
江苏省家禽科学研究所,扬州225125
国内会议
江苏扬州
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596-607
2019-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）