六种鸭易感病毒多重PCR检测方法建立
为建立快速检测1 型鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭呼肠孤病毒和鸭H9N2 低致病性禽流感病毒的多重PCR 方法,实现鸭病毒性疾病的简便、快速检测,根据Genebank 公布的各病毒蛋白基因序列,设计合成可扩增不同大小DNA 片段的6 对特异性引物,单重PCR 确定引物特异性,再通过条件优化,建立多重PCR 体系,并开展了特异性和敏感性测定。利用多重PCR 检测病毒混合感染的鸭胚和临床疑似病料,验证多重PCR 的可行性。结果 显示,引物能特异性扩增目的 片段,与其他病毒无交叉扩增;建立的多重PCR 能从病毒基因组混合物中扩增6 个大小不一的DNA 片段,在模板量低至102 copies/μl 时也能同时特异性检测出6 种鸭易感病毒核酸,而且能检出6 种病毒共同感染鸭胚中的病毒核酸,对临床样品的检测结果与单重PCR 相符。结果 表明,本研究建立的多重PCR 方法可特异、敏感、高通量地检测6 种鸭易感病毒,可用于临床上鸭病毒感染样品的鉴别诊断。
鸭 病毒 多重PCR 检测
陈梓岳 姚璇 陈正铭 曾雨馨 田浩然 朱其志 王永娟
江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州 225300
国内会议
江苏扬州
中文
645-653
2019-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)