重组蛋白CTB-P97R1对猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫效果的评价
(目的)为提高滴鼻免疫条件下猪支原体肺炎活疫苗的免疫效果,(方法)本研究设计引物扩增猪肺炎支原体P97R1 基因,融合至CTB 基因下游,构建了重组质粒pET-CTB-P97R1.重组菌经IPTG 诱导表达、分离纯化得到CTB-P97R1 重组蛋白.利用体外神经节苷脂(GM1)结合试验检测CTB-P97R1 的佐剂活性.随后将CTB-P97R1 与活疫苗混合后滴鼻免疫小鼠,免疫后采血和收集支气管肺泡灌洗液(BALF),分别检测其中的特异性IgG 抗体和sIgA 抗体的水平评价免疫效果.(结果)结果显示,重组蛋白CTB-P97R1 可以特异性结合GM1 具有生物学活性.小鼠免疫后的血清IgG 抗体显著高于活疫苗对照组(P<0.01),同时产生了高水平的P97R1 特异性IgG 抗体(P<0.01); 小鼠BALF 中的sIgA 抗体也显著高于活疫苗对照组(P<0.05).(结论)结果表明,重组蛋白CTB-P97R1 能够显著增强经滴鼻免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫效力,同时可提升P97R1 的免疫应答,有望作为经黏膜免疫的猪支原体肺炎活疫苗的新型佐剂.
霍乱毒素B亚单位 P97R1 佐剂 滴鼻 猪支原体肺炎活疫苗
韦艳娜 张珍珍 王丽 王佳 陈蓉 冯志新 邵国青 熊祺琰
江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏 南京210014
国内会议
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855-864
2019-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)