猪丁型冠状病毒CH/GX1468B-2017的分离鉴定及全基因序列分析
本研究旨在获得可在细胞培养中稳定生长增殖的猪丁型冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)分离毒株,并对其全基因组序列进行测定分析.应用LLC-PK细胞从PDCoV阳性的腹泻仔猪肠道内容物中进行病毒分离传代,通过观察细胞病变、间接免疫荧光和RT-PCR方法对细胞培养物进行鉴定,应用下一代测序技术对分离毒株全基因组序列进行测定.结果,成功分离到1株PDCoV,命名为CH/GX1468B-2017株.该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖,并引起典型的细胞病变；已在LLC-PK细胞连续传代15代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在108.50TCID50/mL.该毒株全基因组序列长25 399 bp；与23个参考毒株的全基因序列比对显示,核苷酸同源性为97.2％～99.4％,其中与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高为99.4％.全基因组系统进化分析显示,PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ亚群,与东南亚国家毒株亲缘关系密切,处于同一进化分支.本研究成功分离出了 PDCoV CH/GX1468B-2017株并进行了全基因序列分析,为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及诊断制剂、疫苗研制奠定了基础,为PDCoV的遗传进化状况提供了数据支持.
猪丁型冠状病毒(PDCoV) 分离鉴定 全基因 序列分析
秦毅斌 卢冰霞 何颖 梁家幸 周英宁 段群棚 李斌 陈忠伟 刘磊 苏乾莲 蒋冬福 闭炳芬 杨思仪 卢敬专 赵武
广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,南宁 530001
国内会议
南宁
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279-289
2019-03-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）