LPS对人肺泡Ⅱ型上皮细胞表达IL-17RC的影响及机制研究
背景：脓毒症所致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)为临床常见危重症,肺泡上皮细胞损伤是其主要病理改变之一.IL-17是Th17分泌的主要致炎因子,可通过与相应受体(IL-17R)结合,介导炎症细胞到达局部引起组织损伤.IL-17RC是新发现的IL-17家族受体,IL-17RC配体-IL-17已明确参与多种炎症性疾病调控,作为IL-17发挥生物学效应的受体,IL-17RC定会参与肺部炎症性疾病的发生和进展.目的：本研究选取人肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cell type Ⅱ,ATⅡ)A549细胞,以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)为刺激因素,模拟ALI体外模型,探究LPS对A549细胞IL-17RC的影响及相关机制.方法：1、以体外培养的A549细胞为研究对象,首先用琼脂糖凝胶电泳、Western blot方法分别检测A549细胞IL-17RC的核酸和蛋白表达水平.2.以0.01、0.1、1、10μg/ml不同浓度的LPS刺激A549细胞3h；以0.1μg/ml的LPS刺激A549细胞1、3、6、12 h,用RT-PCR检测IL-17RC mRNA水平.然后以0.1μg/ml的LPS刺激A549细胞1、3、6、12、24 h,用流式细胞仪和Western blot方法检测IL-17RC的蛋白水平.3.0.1μg/ml的LPS刺激A549细胞24 h,Western blot方法检测p-Akt水平.结果：1、A549细胞在核酸和蛋白水平表达IL-17RC.2、0.1ug/ml LPS刺激后IL-17RC mRNA表达升高最为显著,刺激3h后IL-17RC mRNA表达最高,6h即降至对照组水平.0.1ug/ml LPS刺激后IL-17RC蛋白水平6h开始升高,至24h达最高峰.3、A549细胞在接受LPS刺激后p-Akt表达增高.结论：LPS通过PI3K/AKT信号通路导致A549细胞IL-17RC表达增高,存在一定的时效和量效关系,以0.1μmg/ml刺激后3h IL-17RC mRNA表达最高,24h蛋白水平表达至最高峰.
LPS IL-17 IL-17RC A549细胞 PI3K/AKT
丁琦
苏州市立医院
国内会议
2017中华医学会呼吸病学年会暨第十八次全国呼吸病学学术会议
福州
中文
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2017-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）