脑泰方对体外hemoglobin诱导的大鼠皮质神经元铁沉积及ROS含量的影响
(0) 目的 探讨脑泰方对hemoglobin 诱导的大鼠皮质神经元细胞内铁沉积与转铁蛋白(transferrin,Tf)及其受体(transferrin receptor,TfR)表达以及ROS 含量的影响,探讨脑泰方的作用机制.方法 原代分离、培养新生SD 大鼠皮质神经元,采用Hemoglobin(10 μmol/L)诱导神经元,模拟建立脑出血后神经元铁超载细胞模型；将培养的原代神经元随机分为5 组：正常组、模型组、空白血清对照组、脑泰方含药血清组和铁死亡(ferroptosis)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine)组,除正常组与模型组给予等量培养液外,其余各组造模同时分别给予相应体积分数10％的空白血清、含药血清及1mM的N-acetylcysteine.采用CCK8 法检测细胞存活率；采用Calcein-AM 染色法检测细胞内铁含量；采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)检测神经元转铁蛋白(Tf)及其受体(TfR)和活性氧簇(reactive oxygen species1,ROS1)表达情况.结果 与正常组比较,模型组神经元细胞存活率明显降低(P＜0.01),细胞内铁含量显著升高(P＜0.01),Tf、TfR 及ROS1 水平显著上调(P＜0.01)；与模型组比较,N-acetylcysteine 组和脑泰方含药血清组细胞存活率显著提高(P＜0.01 或P＜0.05),细胞内铁含量显著降低(P＜0.01),且神经元内Tf、TfR及ROS1 表达明显下降(P＜0.01,P＜0.05)；N-acetylcysteine 组与脑泰方含药血清组比较,差异无显著性(P＞0.05).结论 脑泰方可调控 hemoglobin 诱导的大鼠皮质神经元细胞转铁蛋白及其受体表达,减轻神经元铁超载及ROS 累积,提高神经元细胞存活率；其作用与铁死亡抑制剂相当,提示脑泰方可能是通过调节铁代谢,抑制神经元铁死亡而发挥神经保护作用.
脑泰方 铁死亡 神经元 转铁蛋白 转铁蛋白受体 活性氧簇
曾劲松 喻坚柏 刘检 罗刚 廖君 葛金文
湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007 湖南中医药大学,湖南 长沙 410208
国内会议
长沙
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55-67
2018-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）