蜂王浆中外泌体的分离与鉴定
蜂王浆是由6-18日龄工蜂咽下腺和上颚腺分泌的用来哺育工蜂幼虫和蜂王的乳白色或淡黄色浆状物质;外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,携带RNA、DNA、脂质等,在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用.目前,蜂王浆中是否含有外泌体以及蜂王浆中外泌体的含量仍然是未知的,在本研究中,我们建立了蜂王浆中外泌体的分离方法,并对其进行鉴定,确定了蜂王浆中含有外泌体的事实.利用蜂王浆的等电点调节蜂王浆溶液pH为4.0,通过低速离心与超速离心相结合的方式,分离出蜂王浆中的外泌体,并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析系统和蛋白免疫印迹对分离出的外泌体进行鉴定.结果表明,所分离的颗粒具有膜结构和典型杯状结构的特征,杂质蛋白较少,粒径峰值为136.2 nm,平均粒径为126.5 nm,并含有外泌体标志蛋白TSG101,相关指标均证明分离出的粒子完全吻合外泌体的特征,证明了蜂王浆中含有外泌体.每克蜂王浆可以分离出的外泌体的质量约为22.5 mg,蛋白含量约为9 mg,76.5-136.2 nm的粒子浓度约为4.8×106 particles/mL.建立了蜂王浆中外泌体的分离方法,获得了高纯度的外泌体,并探明了蜂王浆中外泌体的含量.
蜂王浆 外泌体 分离与鉴定
郗学鹏 刘振国 胥保华
山东农业大学动物科技学院,泰安271000
国内会议
2021年中国(广西·梧州)蜂业博览会暨全国蜂产品市场信息交流会
广西梧州
中文
161-161
2021-04-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)