补阳还五汤对肺纤维化小鼠中介导细胞自噬的mTOR蛋白的调控机制研究
目的：观察肺纤维化中介导自噬的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达、自噬在肺纤维化形成中的作用,及补阳还五汤对mTOR蛋白的调控机制.方法：144只C57BL/6小鼠随机分为6组,假手术组(NS)、模型组(BLM)、强的松组(P)、补阳还五汤高(A)、中(B)、低(C)剂量组,每组24只,采用博莱霉素气管注入法复制肺纤维化模型后,分别给予生理盐水、补阳还五汤高、中、低剂量和强的松灌胃,于造模后第7,14,28天分批提取样本.采用HE及Masson染色观察小鼠肺泡炎和纤维化程度；蛋白质免疫印记法(Western blot)检测小鼠肺组织mTOR蛋白、核糖体S6蛋白、微管相关蛋白 1 轻链3Ⅱ(Microtubule-associate Protein 1 Ligjt Chain 3,MAP1LC3-Ⅱ)的表达；电镜检测观察小鼠肺组织自噬情况.结果：1.HE及Masson染色：与NS组相比,BLM组小鼠在7、14、28天肺泡炎及肺纤维化明显(P＜0.01)：与BLM组比,给药组各时间点肺泡炎和肺纤维化程度均有不同程度的改善(P＜0.05)；A组下降最明显,差异有统计学意义(P＜0.05).2.Western blot：BLM组与NS组相比小鼠肺组织mTOR、S6蛋白表达水平明显上调(P＜0.01),各给药组与之相比下调(P＜0.01)；LC3-Ⅱ表达水平下调,(P＜0.01),与各给药组与之相比上调(P＜0.01).3.电镜：NS组细胞形态良好,未见自噬.BLM组细胞形态最差,存在个别自噬.P组及补阳还五汤A、B、C组细胞形态及自噬数量好于BLM组,其中A、B剂量组自噬数量最多.结论：在BLM所致小鼠肺纤维化形成的过程中,小鼠肺组织中mTOR蛋白被激活,自噬抑制,mTOR蛋白通过抑制自噬参与了肺纤维化的发病；补阳还五汤对BLM所致小鼠肺纤维化有一定的治疗作用,其机制可能与其下调介导细胞自噬的mTOR蛋白表达有关.
补阳还五汤 肺纤维化 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR 自噬
潘怡
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2018-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）