恙虫病东方体56-kDa型特异性抗原基因的表达及抗原性鉴定
目的 表达和鉴定恙虫病东方体特异性诊断抗原,为恙虫病诊断试剂的研发提供实验基础.方法 从恙虫病病例血液标本中提取恙虫病东方体核酸,PCR扩增4个不同基因型56-kDa特异性抗原基因,目的基因被定向克隆到原核表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定和镍柱纯化,用病人恢复期血清进行免疫印迹法(Western blot)鉴定重组蛋白的抗原性.结果 从4个不同基因型别的病例血清中扩增出Karp、Kato、TA763和Gillima的部分56-kDa抗原基因,片段大小1,350~1,410bp左右,分别表达并纯化出分子量大小为56.59~58.44 kDa的4个重组蛋白,重组的4种蛋白均与恢复期病例血清有良好的反应.结论 成功表达出恙虫病东方体4个型特异性抗原蛋白,表达的重组蛋白具有良好的抗原性.
恙虫病东方体 恙虫病 抗原 表达 诊断
吴德 周惠琼 谈琦琪 张欢 张欣
511430广东,广州广东省疾病预防控制中心病原微生物检验所
国内会议
内蒙古海拉尔
中文
425-431
2018-06-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)