杜梨不同组织总RNA提取方法比较及质量分析
[目的]针对杜梨组织中富含多酚、多糖等次生代谢物质特点,筛选从杜梨不同组织中提取高质量RNA的方法.[方法]以杜梨不同组织(根、茎、叶、花和果)为材料,分别采用Trizol法、改良CTAB法和RNAprep Pure Plant Kit试剂盒法提取总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳和NanoDrop 2000微量分光光度计对RNA进行质量检测.[结果]3种方法均能提出杜梨不同组织中总RNA,但RNAprep Pure Plant Kit法提取的总RNA电泳条带清晰、完整性较好,根、茎、叶、花和果提取的 RNA 纯度分别为2.07、2.02、2.01、2.01和2.02；浓度分别为 186.2 ng·μL-1、174.5 ng·μL1、163.6 ng·μL1、167.3 ng·μL-1和121.1 ng·μL-1.以RNAprep Pure Plant Kit试剂盒法提取的总RNA反转录成cDNA为模板,内参基因PbUBI为目的基因进行RT-PCR扩增,均可获得明亮单一条带.[结论]RNAprep Pure Plant Kit试剂盒法更适用于杜梨不同组织总RNA提取,可为下一步进行基因克隆及功能验证等分子生物学研究奠定基础.
杜梨 不同组织 总RNA 纯度 浓度
庞宏光 许建锋 张江红 张玉星 亓宝秀
河北农业大学园艺学院,河北保定071001 河北农业大学园艺学院,河北保定071001;北京林果业生态环境功能提升协同创新中心,北京100000
国内会议
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中文
66-70
2018-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）