栀子提取物ZZ1对甲型H1N1流感病毒RNA聚合酶与宿主因子CaMKⅡ相互作用的影响
目的：分别观察甲型流感病毒感染MDCK细胞模型中的病毒载量；感染A549细胞模型中CaMKⅡ相关宿主因子表达量的变化；以及293T细胞中RNA聚合酶活性的变化.从细胞、分子和基因水平阐明流感病毒感染的生物学机制,并在此基础上进一步讨论中药栀子提取物ZZ1的抗病毒作用机理.方法：采用细胞病变的CPE法,计算药物的细胞半数致死量(TC50)、50％抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI)；采用实时荧光定量RT-PCR法,在流感病毒感染MDCK细胞后不同时间点,检测被感染细胞中的病毒载量；通过免疫蛋白印迹(western blotting)法,在流感病毒感染A549细胞后不同时间点,分别检测细胞中CaMKⅡ、CREB和c-fos蛋白的表达；采用双荧光素酶报告基因检测法,判断流感病毒RNA聚合酶活性的变化.结果：栀子提取物ZZ1的TC5o为：0.793 mg·ml-1、IC50为0.0467mg·ml-1,TI为16.98；病毒感染MDCK细胞后,细胞内病毒载量上升,ZZ1各剂量组在不同时间段均能不同程度降低细胞内的病毒载量；流感病毒感染细胞后CaMKⅡ明显降低,CREB和c-fos明显升高,给药后,这一程度明显改善；流感病毒RNA聚合酶表达质粒转染293T细胞后,阳性对照组的RNA聚合酶相对表达量较阴性对照组明显增高,ZZ1两个剂量组对RNA聚合酶活性呈现明显的抑制作用.结论：中药栀子提取物ZZ1可以降低体外病毒载量,可以降低细胞中流感病毒RNA聚合酶的活性,且可能是通过参与CaMKⅡ与流感病毒相互作用的过程,来发挥抗病毒作用.
甲型H1N1流感病毒 RNA聚合酶 栀子提取物 CaMKⅡ
包蕾 郭姗姗 崔晓兰
中国中医科学院中药研究所,北京100029
国内会议
全国第十六次中医药防治感染性疾病学术会议、彭胜权教授从医从教60周年暨温病学教学研讨会
广州
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299-318
2018-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）