两条天花粉胰蛋白酶抑制肽的基因克隆及序列分析
当前许多天然药物都是以新鲜植物为材料进行一系列现代分析技术研究的,而在一些干燥的中药材中,也存在功能活性蛋白质和多肽.本文从一种常用药材——天花粉中的克隆出两种新型胰蛋白酶抑制肽(TKTI-2和TKTI-3),首次从长期室温保存的干燥中药饮片中提取出mRNA并成功构建cDNA文库.这两种生物合成前体的cDNAs被成功克隆并测序,结果显示TKTI-3在成熟肽高度保守的Pl-Pl'反应位点存在氨基酸替代.为了证实这种取代非人为现象,本文提取天花粉总蛋白,将其还原和烷基化后进行胰蛋白酶化.LC-MS/MS检测到TKTl-3中存在独特的胰蛋白酶肽,证实该蛋白确实在天花粉中表达.该研究表明,mRNA可存在于非新鲜的植物材料中,且对于一些难以获得转录数据的植物样品,该方法不失为探索活性蛋白及肽类物质的新选择.
干药材 栝楼 天花粉 胰蛋白酶抑制肽 分子克隆 MS/MS序列分析
桑梦如 吴啟南 应缘 马成帮 奚昕平 周玫 王雷 Olaf R.P.Bininda-Emonds 陈天豹
南京中医药大学药学院,中国南京210023;贝尔法斯特女王大学药学院,英国 贝尔法斯特BT9 7BL 南京中医药大学药学院,中国南京210023;江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,中国南京210023 贝尔法斯特女王大学药学院,英国 贝尔法斯特BT9 7BL 奥尔登堡大学第五学院,德国奥尔登堡26111
国内会议
兰州
中文
132-136
2018-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）