枳壳CBF类似基因的克隆及融合基因表达载体的构建

摘要：

CBF基因是植物抗寒过程中一个关键的转录因子。根据已发表序列设计合成引物，以枳壳总基因组DNA为模板克隆CBF及其启动子序列，在产物5”端引入Sall酶切位点。同时根据NCBI里的PX6-CFP序列设计引物，以PMV载体为模板扩增GFP，在产物3”端引入sall酶切位点。通过sall酶切连接构建融合基因CC。通过酶切连接将融合基因CG导入表达载体pCAMBIA2301，构建一个新的融合基因表达载体CG2301，在农杆菌介导下将融合基因转入柑橘中，试图通过GFP的荧光来检测CBF的时空表达情况，目前已筛选出抗性芽，长势良好，转化仍在进行中。载体的构建为CBF功能验证及柑橘的遗传转化奠定了基础。

关键词： 融合基因 载体构建 基因克隆 植物抗寒 枳壳

作者: 许淼 王会良 何利刚 赵运军 刘德春 孙中海

作者单位: 教育部园艺植物生物学重点实验室,华中农业大学国家柑橘育种中心,湖北 武汉 430070

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会

会议地点: 长沙

会议语种:中文

页码: 36-40,44

在线出版日期: 2007-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）