以睾酮为探针的HPLC法测定CYP3A1酶活性的方法学研究
目的:建立以睾酮为探针测定SD大鼠CYP3A1酶活性的简便,稳定,快速,重复性好的高效液相方法. 方法:以咪达唑仑为内标,采用Hypersil C1s分析柱(5μm,250×4.6mm),以甲醇-10mmol·L-1Na2HPO4水溶液(pH8.25)-(60∶40,V/V)为流动相等梯度洗脱,在254nm波长、流速为1mL.min-1时检测样品.样品用乙酸乙酯萃取后,重溶进样,进样量为20uL. 结果:在1.25～100ug·mL-1的范围内,6-β-羟基睾酮浓度与峰面积比的线性关系良好(r=0.9998),最低定量限为1.25ug·mL-1;6-β-羟基睾酮的萃取回收率为83.9％～87.4％,RSD≤8.82％,相对回收率为100.4％～103.4％,RSD≤7.05％;平均日内、日间RSD均小于10％.样本萃取液放置24h以及样本室温放置4h,均稳定性良好. 结论:本实验所建立的高效液相方法简单稳定,重现性好,适用于体外测定睾酮及其代谢物6-β-羟基睾酮,也可用于体外评估CYP3A1酶的活性.
肝组织 CYP3A1酶 代谢活性 高效液相色谱法
周望 邓多 周文菁 刘韬 黄红兵
华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心,广州市510060
国内会议
广州
中文
326-334
2013-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）