人源性抗丙型肝炎病毒包膜糖蛋白2Fab抗体库的构建

摘要：

　　目的：构建人源性HCV Fab片段噬菌体抗体库，并利用表达的包膜糖蛋白E2为抗原进行亲和富集筛选，为下一步的中和抗体的表达及中和活性的检测研究提供了基础。方法：提取外周血淋巴细胞RNA，然后利用反转录方法分别克隆出轻链和重链抗体基因；将轻链抗体基因与载体pComb3X连接，构建轻链抗体库，然后再构建重链和轻链混合抗体库；经过辅助噬菌体M13K07的挽救，利用HCV包膜糖蛋白E2对噬菌体Fab抗体库进行亲和富集筛选。结果：从63名丙型肝炎患者外周血单个核细胞中得到抗体轻链和重链基因，完成抗HCV包膜糖蛋白E2 Fab抗体噬菌体展示库的构建，其库容为1.1 x 107／ml，库容及多样性符合筛选要求；以ELISA方法通过5轮亲和富集筛选获得了特异性Fab抗体Fab 2D5和Fab 1C8。结论：抗体库的构建及Fab抗体的筛选为下一步的表达及中和活性的检测研究提供了很好的基础。

关键词： 丙型肝炎病毒 包膜糖蛋白2 Fab抗体库 噬菌体展示技术

作者: 周云 赵甫涛 马力 何瑜 王宇 马致远 汪鸿 贾战生

作者单位: 西安，第四军医大学唐都医院 710038

会议类型: 国内会议

会议名称: 第八届全国肝脏疾病临床学术大会暨第四届中国-印度尼西亚肝病峰会

会议地点: 南宁

会议语种:中文

页码: 112-115

在线出版日期: 2012-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）