重组鼠疫菌LcrV抗原的制备工艺研究
研究并建立重组鼠疫耶尔森氏菌LcrV抗原(Yersinia pestisV Antigen)的发酵与纯化工艺。通过观察LcrV工程菌pET-V/BL21(DE3)在试管和锥形瓶中的生长和表达规律，确定了最佳培养基、最佳诱导剂(IPTG)浓度、最佳诱导时间等条件，然后放大到30 L半自动发酵罐中进行补料批培养。发酵中采用限制性流加氮、碳源，保持溶解氧20％，pH7.0，结果经IPTG(1 mM)诱导4 h，最终菌体密度达到39A600(相当于干菌15.6 g/L)。重组蛋白V抗原的表达量占菌体总蛋白的35％左右，含量达到1.54 g/L。收获菌体经冻融，离心分离上清高压匀浆后，依次经Q.Sepharose H.P.，Phenyl Sepharose 6 FF，Superdex75 prep grade柱层析纯化，每升发酵产物最终可以得到0.18g左右、纯度为95％以上的重组鼠疫菌LcrV抗原，整个纯化工艺的蛋白回收率为14.0％。
鼠疫 耶尔森氏菌 纯化工艺 蛋白回收率 LcrV抗原
胡丽娜 魏东 万艳 马维民 常娅莉 傅林锋 王秉翔
兰州生物制品研究所，兰州 730046 中国药品生物制品检定所，北京 100050
国内会议
兰州
中文
182-190
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）