抗人CD4人鼠嵌合抗体的基因构建及其在真核细胞中的瞬时表达
目的：构建抗CD4真核表达载体并在真核细胞中进行瞬时表达。 方法：分别扩增人IgG1κ抗体恒定区基因和抗CD4鼠单抗可变区基因并采用SOE(Gene splicing byovertap extension)法进行拼接，然后分别与真核表达载体pOptiVECTM-TOPO和pOptiVECTM-TOPO进行连接。将构建的抗cD4真核表达载体pOptiVEC-H和pcDNA3.3-L以及pOptiVEC-L和pcDNA3.3-H分别瞬时共转染真核细胞CHO-S，以RT-PCR鉴定嵌合抗体基因转录，以间接ELISA和直接免疫荧光法(Direct immunofluorescenceassay)鉴定嵌合抗体基因的表达。 结果：成功构建了抗CD4真核表达载体pOptiVEC-H和pcDNA3.3-L以及pOptiVEC-L和peDNA3.3-H，并在真核细胞CHO-S中实现了瞬时表达。 结论：为抗CD4嵌合抗体基因实现稳定表达打下一定基础。
嵌合抗体 瞬时表达 真核细胞 基因转录 直接免疫荧光法
胡迪超 张爱华 闭兰 张雪 潘勇兵 孙可芳 杨晓明
武汉生物制品研究所，武汉 430060
国内会议
兰州
中文
358-363
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）